发布日期:2022-04-20 点击率:24
本文中,小编将对蛋白质生物芯片、蛋白质芯片分类予以介绍,如果你想对二者的详细情况有所认识,或者想要增进对二者的了解程度,不妨请看以下内容哦。
一、什么是蛋白质生物芯片
用于快速检测大量未知蛋白质的一种小型蛋白质阵列。其作用原理与DNA芯片相似。先在一小片基板上点上大量已知蛋白质(如单克隆抗体),然后让其与未知蛋白质样品接触和反应,由于抗原与抗体间的特异性结合,最后可用激光等手段加以检测。
蛋白质生物芯片的机理在于先在一小片基板上点上大量已知蛋白质(如单克隆抗体),然后让其与未知蛋白质样品接触和反应,由于抗原与抗体间的特异性结合,最后可用激光等手段加以检测。一般每平方厘米的芯片上可点上1万个以上的蛋白质点。
蛋白质生物芯片的优点是在不破坏蛋白质的生化特性和作用的正常条件下,简便、快速、准确、高效地测定大量未知蛋白质的种类和含量,故是蛋白质基础研究和临床检测技术中的一项重大革新。例如,在基础研究中,对大量不同蛋白质的快速识别,蛋白质结构的研究,蛋白质与蛋白质分子间及其与糖分子间相互作用的研究等在医疗实践中,对癌症、早老性痴呆和心脏病人的早期诊断,以及对个性化药物的选择和使用等,都有重要的作用。
二、蛋白质芯片分类
蛋白质芯片是一种高通量的蛋白功能分析技术,可用于蛋白质表达谱分析,研究蛋白质与蛋白质的相互作用,甚至DNA-蛋白质、RNA-蛋白质的相互作用,筛选药物作用的蛋白靶点等。
蛋白芯片主要有三类:蛋白质微阵列、微孔板蛋白质芯片、三维凝胶块芯片等。
(一)蛋白质微阵列
哈佛大学的Macbeath和SchreiberL等报道了:通过点样机械装置制作蛋白质芯片的研究,将针尖浸入装有纯化的蛋白质溶液的微孔中,然后移至载玻片上,在载玻片表面点上1nl的溶液,然后机械手重复操作,点不同的蛋白质。利用此装置大约固定了10,000种蛋白质,并用其研究蛋白质与蛋白质间,蛋白质与小分子间的特异性相互作用。Macbeath和Schreiber首先用一层小牛血清白蛋白(BSA)修饰玻片,可以防止固定在表面上的蛋白质变性。由于赖氨酸广泛存在于蛋白质的肽链中,BSA中的赖氨酸通过活性剂与点样的蛋白质样品所含的赖氨酸发生反应,使其结合在基片表面,并且一些蛋白质的活性区域露出。这样,利用点样装置将蛋白质固定在t3SA表面上,制作成蛋白质微阵列。
(二)微孔板蛋白芯片
Mendoza等在传统微滴定板的基础上,利用机械手在96孔的每一个孔的平底上点样成同样的四组蛋白质,每组36个点(4×36阵列),含有8种不同抗原和标记蛋白。可直接使用与之配套的全自动免疫分析仪,测定结果。适合蛋白质的大规模、多种类的筛选。
(三)三维凝胶块芯片
三维凝胶块芯片是美国阿贡国家实验室和俄罗斯科学院恩格尔哈得分子生物学研究所开发的一种芯片技术。三维凝胶块芯片实质上是在基片上点布以10000个微小聚苯烯酰胺凝胶块,每个凝胶块可用于靶DNA、RNA和蛋白质的分析。这种芯片可用于筛选抗原抗体、酶动力学反应的研究。该系统的优点是:凝胶条的三维化能加进更多的已知样品,提高检测的灵敏度;蛋白质能够以天然状态分析,可以进行免疫测定、受体、配体研究和蛋白质组分分析。
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